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微生物肥料行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)(NY 227-94) 
(發(fā)布日期:2007-5-23 10:23:18)
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    標(biāo)準(zhǔn)類別:NY-行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)(農(nóng)業(yè))

  關(guān)鍵詞:微生物肥料

  標(biāo)準(zhǔn)號:NY227—94

  標(biāo)準(zhǔn)名稱:微生物肥料*

  標(biāo)準(zhǔn)分類:農(nóng)業(yè)土壤化肥標(biāo)準(zhǔn)

  頒布部門:

  頒布日期:

  實(shí)施日期:

 ========================================================

  1主題內(nèi)容與適用范圍

  本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了微生物肥料產(chǎn)品的分類、技術(shù)要求、試驗方法、檢驗規(guī)則、包裝、標(biāo)志、運(yùn)

  輸與貯存。

  本標(biāo)準(zhǔn)適用于有益微生物制成的,能改善作物營養(yǎng)條件(又有刺激作用)的活體微生物肥料制品。

  2引用標(biāo)準(zhǔn)

  GB8172蛔蟲卵測定方法

  GB4789大腸菌值測定方法

  GB7468總汞測定方法

  GB7471總鎘測定方法

  GB7466總鉻測定方法

  GB7485總砷測定方法

  GB7470總鉛測定方法

  3產(chǎn)品分類

  31根瘤菌肥料:能在豆科植物上形成根瘤(或莖瘤),同化空氣中的氮?dú),供?yīng)豆科植物

  的氮素營養(yǎng)。用根瘤菌屬(Rhizobium)或慢生根瘤菌屬(Bradyrhizobium)的菌株制造。

  32固氮菌肥料:在土壤和很多作物根際中同化空氣中的氮?dú),供?yīng)作物氮素營養(yǎng);又能

  分泌激素刺激作物生長。用下列菌種之一制造。

  固氮菌屬(Azotobacter)

  氮單胞菌屬(Azomonas)

  固氮根瘤菌屬(Azorhizobium)

  根際聯(lián)合固氮菌:固氮螺菌屬(Azospirillum)

  陰溝腸桿菌(Enterobactercloacea)經(jīng)鑒定為非致病菌

  糞產(chǎn)堿菌(Alcaligenesfaecalis)經(jīng)鑒定為非致病菌

  肺炎克氏桿菌(Klebsiellapneumoniae)經(jīng)鑒定為非致病菌

  其他經(jīng)過鑒定的用于固氮菌肥料生產(chǎn)的菌種。

  這些菌主要特征是在含一種有機(jī)碳源的無氮培養(yǎng)基中能固定分子態(tài)氮。

  33磷細(xì)菌肥料:能把土壤中難溶性磷,轉(zhuǎn)化為作物可以利用的有效磷,改善作物磷素營

  養(yǎng)。用下列菌種之一制造。

  分解有機(jī)磷化合物的細(xì)菌:

  解磷巨大芽胞桿菌(Bacillusmegatheriumphosphaticum)

  解磷珊瑚紅賽氏桿菌(Serratiacarolleraphosphaticum)

  節(jié)桿菌屬中的一些種(Arthrobactersp.)

  轉(zhuǎn)化無機(jī)磷化合物的細(xì)菌:

  假單胞菌屬中的一些種(Pseudomonassp.)

  其他經(jīng)過鑒定的用于磷細(xì)菌肥料生產(chǎn)的菌種。

  有機(jī)磷細(xì)菌在含磷礦粉或卵磷脂的合成培養(yǎng)基上有一定解磷作用,在麥麩發(fā)酵液中都含刺激植物生長的生長素物質(zhì)。

  無機(jī)磷細(xì)菌具有溶解難溶性磷酸鹽的作用。

  34硅酸鹽細(xì)菌肥料:能對土壤中云母,長石等含鉀的鋁硅酸鹽及磷灰石進(jìn)行分解,釋放

  出鉀、磷與其他灰分元素,改善作物的營養(yǎng)條件。本品的生產(chǎn)菌種為膠質(zhì)芽胞桿菌(Bacil

  lusmucilginosus)的菌株及其他經(jīng)過鑒定的用于硅酸鹽細(xì)菌肥料生產(chǎn)的菌種。

  該菌在含鉀長石粉的無氮培養(yǎng)基上有一定解鉀作用,菌體內(nèi)和發(fā)酵液中存在刺激植物生長的生長素物質(zhì)。

  35復(fù)合微生物肥料:含有上述(解磷、解鉀、固氮微生物)或其他經(jīng)過鑒定的兩種以

  上互不拮抗微生物,通過其生命活動,能增加作物營養(yǎng)供應(yīng)量。

  4技術(shù)要求

  41成品技術(shù)指標(biāo)1)

  表1成品技術(shù)指標(biāo)1)

  劑型液體固體顆粒

  項目

  黑褐色或褐色粉

  1.外觀無異臭味液體褐色顆粒

  狀、濕潤、松散

  2有效活菌數(shù)

  根瘤菌肥料

  慢生根瘤菌,億/mL#511

  快生根瘤菌,億/mL#1021

  固氮菌肥料,億/mL#511

  硅酸鹽細(xì)菌肥料,億/mL#1021

  磷細(xì)菌肥料

  有機(jī)磷細(xì)菌,億/mL#511

  無機(jī)磷細(xì)菌,億/mL#1532

  復(fù)合微生物肥料,億/mL#1021

  3水分,%-20!35<10

  4細(xì)度,mm-粒徑0.18粒徑2.5!4.5

  5有機(jī)質(zhì)(以C計),%#2025

 。ㄒ则问茸鳛槲絼┎辉诖肆校

  6pH5.5!76.0!7.56.0!7.5

  7雜菌數(shù),%$51520

  8有效期不得低于六個月

  注:1)在產(chǎn)品標(biāo)明的失效期前有效活菌數(shù)應(yīng)符合指標(biāo)要求,出廠時產(chǎn)品有效活菌數(shù)必須高出本指檔30%以上。

  42成品無害化指標(biāo)

  表2成品無害化指標(biāo)

  編號參數(shù)單位標(biāo)準(zhǔn)限值

  1.蛔蟲卵死亡率%95!100

  2大腸桿菌值101

  3汞及化合物(以Hg計)mg/kg$5

  4鎘及化合物(以Cd計)mg/kg$3

  5鉻及化合物(以Cr計)mg/kg$70

  6砷及化合物(以As計)mg/kg$30

  7鉛及化合物(以Pb計)mg/kg$60

  5檢測方法

  51外觀

  感觀檢驗符合41成品技術(shù)指標(biāo)。

  52有效活菌數(shù)和雜菌含量測定

  521試劑和溶液

  a.無菌水、蒸餾水;

  b.選擇培養(yǎng)基(附錄A);

  c.剛果紅染液(0.5%)。

  522儀器

  a.顯微鏡1000;

  b.搖床旋轉(zhuǎn)式200r/min;

  c.恒溫培養(yǎng)箱;

  d.恒溫烘干箱;

  e.滅菌鍋;

  f.扭力天平(分度值0.01g);

  g.玻璃儀器(滅菌的9cm平皿、10mL、5mL、1mL吸管、三角瓶、玻璃刮刀)。

  523測定步驟

  5231采樣應(yīng)不少于500g,從中稱取10!20g

 。ň_0.01g),加入帶玻璃珠的100!

  200mL的無菌水中(液體菌劑取10!20mL,加入90!180mL的無菌水中),靜置20min后在

  旋轉(zhuǎn)式搖床上200r/min充分振蕩30min,即成母液的菌懸液。

  5232用無菌吸管吸取5mL上述母液的菌懸液加入45mL無菌水中,混勻成110稀釋的菌懸液,這樣依次稀釋,分別得到11l02,11103和11104,11105等濃度(每個稀釋度必須更換無菌吸管)。

  5233用1mL無菌吸管分別吸取不同稀釋度菌懸液0.1mL,加至直徑為9cm平皿的瓊脂培養(yǎng)基表面,用無菌玻璃刮刀將菌懸液均勻地涂于瓊脂表面;蛉1mL不同稀釋度菌懸液加入培養(yǎng)皿內(nèi),與瓊脂培養(yǎng)基混勻。每個樣品取3個連續(xù)適宜稀釋度,每一稀釋度重復(fù)3次,同時加無菌水的空白對照,培養(yǎng)2!5d,每個稀釋度取5!10個菌落的菌體,涂片染色,顯微鏡觀察識別后計數(shù)菌落。

  524計算公式:

  統(tǒng)計算出同一稀釋度三個平皿上菌落平均數(shù)。

  根據(jù)式(1)和式(2)計算:

  菌劑含菌數(shù)=菌落平均數(shù)稀釋倍數(shù)母液菌懸液的體積

  菌劑數(shù)…………(1)

  雜菌率(%)=雜菌數(shù)

  有效菌數(shù)+雜菌數(shù)100……………………(2)

  根據(jù)菌落特征判定,分別計算出制品中的特定微生物及雜菌數(shù)率。固體(包括顆粒)菌劑含菌數(shù)以億/g表示,液體菌劑含菌數(shù)以億/mL表示。

  525菌落計數(shù)

  5251以平板上出現(xiàn)30!300個菌落數(shù)的稀釋度平板為計數(shù)標(biāo)準(zhǔn)。

  5252當(dāng)只有一個稀釋度,其平均菌落數(shù)在30!300之間時,則以該平均菌落數(shù)乘以其稀釋倍數(shù)(見表3例1)。

  5253若有兩個稀釋度,其平均菌落數(shù)均在30!300之間,應(yīng)按兩者菌落總數(shù)之比值來決定。若其比例小于2應(yīng)計數(shù)兩者的平均數(shù),若大于2則計數(shù)其中稀釋較小的菌落總數(shù)(見表3例2及例3)。

  5254若三個稀釋度的平均菌落數(shù)均大于300,則應(yīng)按稀釋度最高的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)(見表3例4)。

  5255若三個稀釋度的平均菌落數(shù)均小于30,則應(yīng)按稀釋度最低的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)(見表3例5)。

  5256若三個稀釋度的平均菌落數(shù)均不在30!300之間,則以最接近300或30的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)(見表3例6)。

  表3計算菌落總數(shù)方法的示例

  不同稀釋度的平均菌落數(shù)兩個稀釋度菌落總數(shù)

  例次10-510-610-7菌落數(shù)之比個/mL或個/g

  1143115922-1.6108

  22760235311.32.7108

  32676136342.51.4108

  4無法計數(shù)1142312-3.1109

  528125-2.8106

  6無法計數(shù)30318-3.0108

  53含水量測定

  531儀器

  a.土壤鋁盒;

  b.扭力天平(分度值0.01g);

  c.恒溫烘干箱;

  d.干燥器。

  532測定步驟

  稱取樣品30!40g

 。ň_到0.01g)二份放入鋁盒中,于105條件下烘烤4h直至恒重,

  取出后放入干燥器內(nèi)冷卻,一般冷卻20min,再稱其殘重和鋁盒重,損失量即為水分含量。

  533計算公式:

  m

  H0-m1

  2O%=m100……………………………………………………………(3)

  0

  式中:m0———表示烘干前樣品重,g;

  m1———表示烘干后樣品重,g。

  54pH值測定

  541試劑和溶液

  無離子水。

  542儀器

  a.燒杯;

  b.酸度計;

  c.扭力天平(分度值0.01g)。

  543測定步驟

  隨機(jī)稱取樣品8g,將樣品置于干凈燒杯內(nèi),按12加入無離子水,浸泡振蕩均勻。預(yù)熱pH計,用標(biāo)準(zhǔn)溶液(pH6.86)校正儀器后,測定樣品懸液pH,邊測邊攪拌,儀器讀數(shù)穩(wěn)定后記錄。每個樣品重復(fù)三次。
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